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新生牛血清怎樣避免產(chǎn)生沉淀
更新時(shí)間:2020-11-14瀏覽:1459次
   新生牛血清是一種旨在用于各種動(dòng)物細(xì)胞、胚胎細(xì)胞、組織器官的培養(yǎng)以及細(xì)
  胞融合和單抗制備等。取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
  在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,應(yīng)該遇到過使用的新生牛血清系列產(chǎn)生沉淀的問題,溶解后有沉淀,往往還怕是染菌,即使不是染菌有些沉淀在細(xì)胞瓶?jī)?nèi)也會(huì)影響生長(zhǎng),注意一些小的細(xì)節(jié)還是非常有必要的:
  一般推薦在-20℃儲(chǔ)存新生牛血清系列,避免反復(fù)凍融。
  解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產(chǎn)生沉淀物。
  解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
  請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
  新生牛血清系列的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
  若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。
  溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
  實(shí)驗(yàn)提示
  1、建議使用10%的新生牛血清用于常見細(xì)胞的體外培養(yǎng)
  2、建議使用20%的新生牛血清用于人體正常細(xì)胞的體外培養(yǎng)
  注意事項(xiàng)
  1、操作時(shí),避免污染母液
  2、操作時(shí),須戴手套
  3、避免反復(fù)凍融
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